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科技创新

紫锥菊提取多酚含量试验

紫锥菊在欧美各国被广泛用于免疫促进和调节剂,其预防和治疗各种感染性疾病的疗效得到越来越多临床医生的肯定。目前,紫锥菊植物在我国已成功引种并形成了一定的规模,紫锥菊提取物的市场应用于需求发展迅速,主要规格是4%紫锥菊多酚。本次实验中,源森生物对国内市售6批紫锥菊提取物进行检测对比,以期为客观评价国内紫锥菊提取物的质量提供依据。
一、市售紫锥菊提取物质量评价实验所需材料
安捷伦高效液相色谱仪;
安捷伦液质联用仪;
UV2401 PC紫外-可见分光光度计;
250W电脑型超声清洗机;
AE240电子分析天平。
绿原酸,没食子酸对照品;
乙腈,甲醇为色谱纯,水为超纯水,无水乙醇、无水碳酸钠为分析纯,福林酚试剂为实验试剂。
6批紫锥菊提取物市售产品(ZZJ-1~ZZJ-6) 购自包括源森生物国内6家生产商。
二、市售紫锥菊提取物质量评价实验方法与结果
(一)对照品溶液的制备
精密称取干燥至恒重的绿原酸对照品10.05mg,置50mL量瓶中,加入70%甲醇溶液少许,超声溶解,70%甲醇溶液定容至刻度,摇匀,得对照品贮备液,再精密移取5mL储备液,置 50mL量瓶中,70%甲醇溶液定容至刻度,即得对照品溶液(0.0201g.L-1)。
(二)供试品溶液的制备
平行取各批次紫锥菊提取物约1.2g,精密称定,分别置圆底烧瓶中,精密加入70%甲醇25mL,精密称定质量,热回流提取15min,冷却至室温,称量并以70%甲醇补足质量,摇匀,静置,取上清液,离心,取续滤液备用。
(三)相关峰的指认及美国药典HPLC方法的优化
1. 相关峰的指认 
利用LC-MS同时参考文献[侯团章,中草药提取物.第1卷[M].北京: 中国医药科技出版社,2004: 9.]中的相对保留时间,对各成分定性。色谱条件为Agilent ODS色谱柱(4.6mmx150mm,5μm);液相方法为美国药典方法,但需要指出的是,需将流动相中不易挥发的磷酸替换为易挥发的甲酸。分别取6批供试品溶液2μL注入色谱仪,记录色谱图,见图1~3。液质TLC图未见紫锥菊苷,其中2个主峰分别为咖啡酸和菊苣酸。

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